凝膠成像分析系統(tǒng)分析詳解
凝膠成像分析系統(tǒng)用于對(duì)電泳凝膠圖像的分析研究，采用數(shù)字?jǐn)z像頭將置于暗箱內(nèi)的電泳凝膠在紫外光或白光照射下的影像取進(jìn)計(jì)算機(jī)，通過(guò)相應(yīng)的凝膠分析軟件，可一次性完成DNA、RNA、蛋白凝膠、薄層層析板等圖像的分析，zui終可得到凝膠條帶的峰值、分子量或堿基對(duì)數(shù)、面積、高度、位置、體積或樣品總量。
從整體總的來(lái)說(shuō)凝膠成像分析系統(tǒng)可應(yīng)用于：蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。
1、分子量定量
對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋?zhuān)詣?dòng)生成擬合曲線，并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
2、凝膠成像分析系統(tǒng)密度定量
一般常用的測(cè)定DNA和RNA濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
3、密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中，凝膠成像分析系統(tǒng)我們zui常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法就是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像分析系統(tǒng)就能完成此項(xiàng)工作。
4、PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類(lèi)似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
凝膠成像分析系統(tǒng)種類(lèi)：
1、普通凝膠成像分析系統(tǒng)系：可以對(duì)蛋白電泳凝膠，DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析。
2、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)：成像范圍涵蓋UV、EB、化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像。
3、多色熒光凝膠成像分析系統(tǒng)：成像范圍涵蓋UV、EB、化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像。
4、多功能活體成像分析系統(tǒng)：UV、EB、化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像和離體組織和小型動(dòng)物，及大型型動(dòng)物。
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